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生化樣本準備方法及要求

更新時(shí)間:2024-05-07      瀏覽次數:118

生化樣本準備方法及要求:

以下所有樣本必須盡量新鮮!

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱(chēng)取動(dòng)物組織重量按重量(mg):體積(μL=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,研磨儀勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000rpm/min,離心10min,取上清液進(jìn)行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2h內或4℃過(guò)夜后于4 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

1.生化、ELISA:可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

2.凝血四項:抽取靜脈血,按照9份靜脈血、1份抗凝劑的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸櫞酸鈉抗凝管中,輕輕顛倒10次使之充分混勻,不得有凝塊,不得形成泡沫。

3.采樣后應盡快分離血漿(60分鐘內進(jìn)行),將標本以3000rpm/min離心10-15min,使血漿分層,取上層血漿。

4.分離后的血漿-20℃以下密封可保存2周。干冰運輸。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來(lái),將培養液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于4℃,3000rpm/min離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。


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