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α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)實(shí)驗的檢驗原理

更新時(shí)間:2024-05-23      瀏覽次數:104

α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)實(shí)驗的檢驗原理

 

產(chǎn)品名稱(chēng):α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)實(shí)驗檢測

英文名稱(chēng):HBDH

反應方法:IFCC(速率法)

樣本類(lèi)型:血清

 

背景介紹:

α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)是一種酶,存在于人體各組織中,以心肌組織含量最多,約為肝臟的2倍,其活性達總酶活力的一半以上。它不是一個(gè)獨立的特異酶,而是乳酸脫氫酶(LDH)的一種同工酶,能催化α-羥丁酸氧化為α-酮丁酸。當心肌受損時(shí),α-羥丁酸脫氫酶就會(huì )釋放到血中,所以血清α-羥丁酸脫氫酶在發(fā)生心肌疾病時(shí)明顯增高。

 

檢驗原理:

主要基于酶促反應的動(dòng)力學(xué)原理。在速率法中,通過(guò)連續監測反應過(guò)程中產(chǎn)物或底物的濃度變化,可以計算出酶促反應的速率,從而確定酶的活性。

對于α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)的速率法檢測,通常使用α-酮丁酸作為底物,在適當的pH和溫度下,HBDH催化α-酮丁酸還原為α-羥丁酸,同時(shí)伴隨著(zhù)NADH(還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)的生成。反應過(guò)程中,通過(guò)監測NADH的生成速率,可以間接推算出HBDH的活性。

 

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30分鐘取上清。

3. 細胞上清液:3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離10分鐘取上清。

5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

送樣須知:

1.南京和上海地區的客戶(hù)可提供上門(mén)取樣服務(wù),提前一天聯(lián)系

2.外地客戶(hù)可郵寄樣本,樣本運輸應符合一般的生物學(xué)要求,密封加冰袋或者干冰運輸

3.若細胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請務(wù)必提前告知

4.測試結束提供實(shí)驗報告后,樣本可以保留1個(gè)月,若需保留樣本或者回收樣本請提前告知。


備注:本公司對客戶(hù)的項目的專(zhuān)有技術(shù)和資料(包括實(shí)驗方案,測試結果,樣本等)負有絕對保密的責任。

α-羥丁酸脫氫酶(HBDH)實(shí)驗的檢驗原理


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