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產(chǎn)品展示/ Product display

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WB實(shí)驗代測

上海信帆生物提供WB實(shí)驗代測服務(wù),代測時(shí)間為7-10天,提供實(shí)驗數據,包括所有試劑,提供分析數據、步驟等,如果你想了解該實(shí)驗服務(wù)的詳細信息,咨詢(xún)!

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間:2022-05-23
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:30464
立即咨詢(xún)

聯(lián)系電話(huà):13764793648

詳細介紹

所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫療等

Western Blotting檢測,WB實(shí)驗代測,WB實(shí)驗服務(wù)

 

Western blot樣本要求

客戶(hù)需新鮮或正確保存的蛋白樣品, 檢測目的蛋白的一抗(或由本公司代購)。樣品要求為:

 

1、裂解樣品總蛋白量>500ug/樣品。

2、細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml。

3、組織樣品總蛋白濃度>10-15mg/ml。

Western blot結果及數據提供

內參蛋白和目的蛋白曝光膠片各一張,可提供掃描圖,實(shí)驗報告,包括整個(gè)試驗流程所涉及的實(shí)驗數據和實(shí)驗步驟。如需進(jìn)行蛋白純化服務(wù),將提供檢測報告



WB實(shí)驗代測

服務(wù)內容

我們提供從蛋白制備、蛋白電泳到Western blot檢測的全流程服務(wù),如需要還可進(jìn)行灰度分析。

說(shuō)明

1、建議提供目的蛋白陽(yáng)性表達樣品(純蛋白或有陽(yáng)性表達的細胞或組織)作為陽(yáng)性對照。

2、每張膜檢測1-8個(gè)樣品。

3、如果一抗由客戶(hù)提供,請在正確條件下保存,避免污染及反復凍融。

 


關(guān)于Western blot實(shí)驗異常分析


『無(wú)信號』

原因建議
一抗與二抗不匹配選擇針對一抗來(lái)源種屬制備的二抗;
一抗不識別目的的種屬的蛋白

1)檢查抗體的說(shuō)明書(shū),適用范圍內是否包含目的種屬
           2)使用陽(yáng)性對照來(lái)檢查抗體質(zhì)量

一抗或二抗不足,沒(méi)有足夠的抗體結合到目的蛋白

1)降低抗體稀釋倍數,增加抗體濃度
           2)延長(cháng)孵育時(shí)間

封閉劑與一抗有交叉反應改變封閉劑
抗原不足

1)每個(gè)泳道加入20-30ug總蛋白
           2)制備樣品要使用蛋白酶抑制物及使用陽(yáng)性對照

在檢測的組織內目的蛋白表達水平低檢測樣本不表達目的蛋白選擇表達量高的細胞作為陽(yáng)性對照,用于確定檢測樣本是否為陰性,也可更換細胞系
蛋白轉膜效率低

1)利用麗春紅檢測轉膜效率;檢查轉移裝置是否電極弄反
           2)轉移前膜是否用甲醇侵泡過(guò)

膜過(guò)渡洗滌減少洗滌時(shí)間和強度
疊氮鈉抑制二抗活性二抗稀釋液內不用疊氮鈉

 

 

『沒(méi)有特異條帶』

原因建議
細胞系傳代過(guò)多后蛋白表達譜發(fā)送變化1)使用未傳代或傳代次數較少的細胞系進(jìn)行樣品制備
蛋白本身有很多修飾1)查閱文獻,確定目的蛋白是否存在多種修飾
蛋白被消化或者降解1)蛋白樣品確保未被污染,確保含有蛋白酶抑制劑
所檢測蛋白存在多種剪接體,導致分子量大小不同1)查閱文獻或者通過(guò)搜索數據庫來(lái)確定該蛋白是否存在多種長(cháng)度不同的編碼mRNA
一抗或二抗濃度高1)減低抗體濃度
洗滌不夠1)充分洗滌

 

 

『條帶大小不正確』

原因建議
目的蛋白被降解確保蛋白樣品未被污染,確保含有蛋白酶抑制劑
存在不同的剪接體查閱文獻或者通過(guò)搜索數據庫來(lái)確定該蛋白是否存在多種長(cháng)度不同的編碼mRNA
重組蛋白檢測是否存在額外加入的蛋白
特殊蛋白如MDM2等仔細閱讀抗體說(shuō)明書(shū)

 

 

尊敬的客戶(hù):
本公司有放射免疫技術(shù)服務(wù)、蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)、免疫組化、PCR技術(shù)服務(wù)、生物信息學(xué)數據分析等,如果您想了解Western blot的更多內容或者其他服務(wù)信息,您可以本公司的了解更多產(chǎn)品的詳細信息,至善至美的服務(wù)是我們永無(wú)止境的追求,歡迎新老客戶(hù)放心選購自己心儀產(chǎn)品,我們將竭誠為您服務(wù)!

WB實(shí)驗代測

 

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